ii.将玻璃板斜靠在试管架上，与实验台面成约10角。这样放置减少了凝胶渗漏和变形的可能。
7.立即将合适的梳子插入到凝胶中，小心勿使梳齿下留有气泡。梳子的顶端应略高于玻璃板的上沿。用铁皮制夹子将梳子夹紧，使其就位。必要时，用剩余的丙烯酰胺溶液完全充满模具。确认无丙烯酰胺溶液从模具里漏出。
8.丙烯酰胺于室温聚合30~60min。若凝胶回缩明显，应补加丙烯酰胺：双丙烯酰胺溶液。聚合完全后，梳齿下可见Schlieren线。
9.聚合完全后，用1XTBE浸润的纸巾包绕梳子和凝胶的顶部，然后用SaranWrap膜密封整块凝胶，4C保存，直至使用。凝胶在使用之前可这样保存1~2d.
10.当准备好进行电泳时，在梳子的周围及其顶部喷些1XTBE缓冲液，从聚合的凝胶中小心取出梳子。用注射器吸取1XTBE冲洗加样孔。用剃须刀或手术刀除去凝胶底部的密封胶带。植子一取出就立即彻底冲洗加样孔。否则梳子所留存的聚丙烯酰胺溶液会在加样孔中聚合，产生不规则的表面，引起DNA条带的变形。
上样与电泳
11.将凝胶放入电泳槽中，用大号铁皮制夹子夹住其边缘或用装置本身的夹子固定。带凹口的玻璃板应面对缓冲液槽向里放置。
12.用配制凝胶溶液同--批次的5XTBE配制电泳缓冲液灌满缓冲液槽。用一根弯头巴斯德吸管或注射器针头排除藏匿于凝胶底部的气泡。缓冲液槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液。离子强度或pH的微小差别会造成缓冲液功能紊乱，从而使DNA片段的迁移严重失真。
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